ISOLASI DAN IDENTIFIKASI SENYAWA METABOLIT SEKUNDER KULIT BATANG KANGKUNG PAGAR (IPOMOEA CARNEA) MENGGUNAKAN METODE EKSTRAKSI REFLUKS, FRAKSINASI CAIR-CAIR, KROMATOGRAFI DAN SPEKTROFOTOMETRI UV-VIS

Abstrak

Penelitian ini bertujuan untuk memperoleh fraksi serta mengevaluasi profil kromatografi senyawa metabolit sekunder dari akar kangkung pagar (Ipomoea carnea) melalui proses ekstraksi, fraksinasi, dan pemisahan menggunakan metode kromatografi. Simplisia akar diekstraksi menggunakan pelarut metanol, kemudian ekstrak difraksinasi dengan metode kromatografi kolom vakum (KCV) menggunakan sistem elusi gradien n-heksana, etil asetat, dan etanol berdasarkan peningkatan kepolaran. Hasil fraksinasi menghasilkan 21 vial dengan variasi warna yang menunjukkan terjadinya pemisahan komponen senyawa. Seluruh fraksi dianalisis menggunakan kromatografi lapis tipis (KLT) dengan fase gerak etanol:etil asetat (9:1), kemudian fraksi yang memiliki pola kromatogram serupa digabungkan. Hasil KLT menunjukkan terbentuknya satu noda tunggal pada pengamatan sinar UV 366 nm dengan nilai Rf sebesar 0,76, sedangkan pada UV 254 nm tidak terdeteksi noda. Isolat hasil pemisahan juga memperlihatkan satu noda tunggal yang mengindikasikan tingkat kemurnian relatif baik. Analisis KLT dua dimensi belum menunjukkan pemisahan yang optimal karena tidak terbentuk noda yang terdefinisi pada UV 254 nm maupun UV 366 nm. Secara keseluruhan, metode KCV dengan sistem eluen gradien serta analisis KLT menggunakan fase gerak etanol:etil asetat (9:1) mampu memisahkan komponen senyawa berdasarkan perbedaan kepolaran. Isolat yang diperoleh diduga termasuk golongan flavonoid, meskipun identifikasi lebih lanjut masih diperlukan untuk memastikan struktur senyawa.

This study aimed to obtain fractions and identify secondary metabolites from the root extract of Ipomoea carnea using chromatographic methods. The dried root material was extracted by maceration using methanol, and the concentrated extract was fractionated by Vacuum Liquid Chromatography (VLC) employing a gradient elution system consisting of n-hexane, ethyl acetate, and ethanol with increasing polarity. The resulting fractions were analyzed using Thin Layer Chromatography (TLC) with an ethanol:ethyl acetate (9:1) mobile phase, followed by purity evaluation using two-dimensional TLC. Fractionation produced 21 vials with different color intensities, indicating separation of compounds according to their polarity. TLC analysis revealed a single spot under UV 366 nm with an Rf value of 0.76, whereas no spot was observed under UV 254 nm. These findings indicate that the ethanol:ethyl acetate (9:1) mobile phase provided good separation of the sample components. Observation of the isolate showed a single well-defined spot without tailing under UV 366 nm, suggesting the possible presence of flavonoid compounds. However, two-dimensional TLC did not produce well-resolved spots, indicating that the isolate purity could not yet be confirmed and further optimization and advanced identification are required. Overall, the results demonstrate that Vacuum Liquid Chromatography is effective for fractionating the root extract of Ipomoea carnea, while TLC and two-dimensional TLC serve as preliminary techniques for evaluating chromatographic profiles and isolate purity.